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病毒采样管保存解决方案主要有两种类型

作者:admin 来源:未知 时间:2021-01-16 16:56:41 点击:

[文章前言]:市场上广泛使用的用于病毒采血管的保存溶液主要有两种,一种是基于输送介质修饰的病毒维持溶液,另一种是用于核酸提取和裂解溶液的修饰的保留溶液。 前者的主要成分是Eagle的基
 
市场上广泛使用的用于病毒采血管的保存溶液主要有两种,一种是基于输送介质修饰的病毒维持溶液,另一种是用于核酸提取和裂解溶液的修饰的保留溶液。
前者的主要成分是Eagle的基本培养基(MEM)或Hank的平衡盐,其中添加了盐,氨基酸,维生素,葡萄糖和病毒生存所需的蛋白质。该防腐溶液以酚红钠盐为指示剂,溶液pH为6.6-8.0时溶液呈粉红色。将必要的葡萄糖,L-谷氨酰胺和蛋白质添加到保存溶液中。蛋白质以胎牛血清或牛血清白蛋白的形式提供,可以稳定病毒的蛋白质外壳。由于该保存溶液富含营养,因此有利于病毒的生存,也有利于细菌的生长。如果细菌在保存液中被污染,它们将繁殖。代谢产物中的二氧化碳会降低防腐液的pH值,从粉红色变为黄色。因此,大多数制造商在配方中添加了抑菌成分。推荐的抑菌剂是青霉素,链霉素,庆大霉素和多粘菌素B。不建议使用叠氮化钠和2-甲基。抑制剂,例如甲基4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI),因为这些成分会对PCR反应产生影响。由于该保存溶液提供的样品基本上是活病毒,因此可以最大程度地保持样品的独创性,不仅可以用于病毒核酸的提取和检测,还可以用于病毒的培养和分离。但是,应注意,当用于检测时,必须在灭活后进行核酸提取和纯化。
 
另一种基于核酸提取裂解物的保存溶液,主要成分为平衡盐,EDTA螯合剂,胍盐(如异硫氰酸胍,盐酸胍等),阴离子表面活性剂(如十二烷)硫酸钠,阳离子表面活性剂(如草酸十四烷基三甲基铵),苯酚,8-羟基喹啉,二硫苏糖醇(DTT),蛋白酶K等几种或多种组分,这种保存溶液是直接裂解病毒以释放核酸并消除核酸分解酶(RNase)。如果仅将其用于RT-PCR,则更合适,但裂解液可以灭活病毒。该样品不能用于病毒培养和分离。
 
建议将EDTA盐(例如乙二胺四乙酸二钾,乙二胺四乙酸二钠等)用于病毒血液采集管保存溶液中的金属离子螯合剂。不建议使用肝素(例如肝素钠,肝素锂)。以免影响PCR检测。

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